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(采访)骨髓检验时都有哪些辅助组化染色?它们分别有什么意义?
我们在骨髓检测的时候,常常要加做一些组化染色,目的一个是来区分原始细胞的来源,它来自于哪?因为原始细胞几乎长得都是一个模样的,很难区分到底是原始粒细胞,还是原始单核细胞,原始淋巴细胞,还是原始巨核细胞,无法区分,怎么办?我们就要做一些细胞化学染色来加以区分。
还有比如慢性粒细胞白血病和感染严重的时候出现的类白血病反应,在骨髓象和外周血象非常的相近,怎么区分?一个是恶性病,一个是良性病,所以我们也要加做一些组化染色。
还有比如我们看着是一个贫血,到底是哪一种贫血?贫血包括这么多种,有缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血、溶血性贫血,还有再生障碍性贫血,还有失血性贫血,到底是其中哪一种?我们就要做一个铁染色来区分一下。所以我们要做一系列的组化染色。
那么组化染色里面铁染色的原理就是,细胞的内外铁在酸性条件下,我们一般用强盐酸,能够和亚铁氰化钾发生一个普鲁士蓝的反应,那么它就形成了一种蓝色的颗粒,这些颗粒就可以定位在有铁存在的部位,我们就能够在显微镜下数出来了,可以看出来。
铁染色的时候,我们分为细胞内铁和细胞外铁,细胞外铁指的是造血岛里头,也是我们常说的骨髓小粒里面的铁,细胞内铁是指的我们有核红细胞里面,胞浆里面的铁颗粒。
为什么要分细胞内铁和细胞外铁?外铁代表的是储存的铁,内铁是代表利用的铁。在缺铁性贫血的时候,开始先缺的是细胞的外铁,后缺的是细胞的内铁。为什么?
举一个例子,比如我们家里头吃饭,这个米桶里头就剩最后一碗米了,我们是给他吃了?还是全家都饿着?留着那一碗米?肯定是要填饱肚子,大家都饿了,那么先把最后一碗米给吃了,现在米桶就空了。这米桶就是储存米的,就相当于储存铁,这碗里最后的饭就相当于利用铁,也就是细胞内铁。
那么补的时候,把米买回来了,是不是先得吃饱?有富余的再放桶里面,不能说买回来了,我们大家还饿着,都存起来。所以先补的是内铁,然后才补的外铁。
我们检测的时候,一旦发现缺铁性贫血的患者,外铁长起来了,那么证明治疗是有效的,因为富余了才存起来的。
所以我们做铁染色的时候,一般是看缺铁性贫血,在缺铁性贫血的时候,内外铁全部都缺乏。
在这个里面,我们还要关注一种铁粒幼细胞,叫环形铁粒幼细胞,就是有至少五个铁颗粒,环绕着幼稚的红细胞的胞核,二分之一以上,这种细胞非常有意义,我们叫它环形铁粒幼细胞。常常见于MDS(骨髓增生异常综合征)的患者,大于15%的时候,我们就是诊断MDS(骨髓增生异常综合征)里的一种特殊的类型,还可以诊断铁粒幼细胞性贫血,这都是非常有意义的。
所以我们诊断MDS(骨髓增生异常综合征)的时候,有时候证据不足的时候,我们还要看一下铁染色,有没有环形铁粒幼细胞,这是铁染色。
那么中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP),我们常常是为了区分什么?就是慢性粒细胞白血病和类白血病反应,一个是良性的,一个是恶性的。
慢性粒细胞白血病是一个恶性病,它的中性粒细胞碱性磷酸酶非常的低,有的时候甚至都是零分,那么感染引起的一个类白血病反应的时候,它的碱性磷酸酶的积分非常的高,所以一下子就把这两个病区分开来了。虽然骨髓象和血象非常的相近,但是一做碱性磷酸酶染色,一下就区分开。
还有就是再生障碍性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿,也叫PNH。这两个疾病在骨髓里头也是非常的相近,都是增生非常减低的。一个是以溶血为主的,一个是以造血本身就是非常减低为主的,那怎么区分?我们也可以做碱性磷酸酶染色,再生障碍性贫血的时候,碱性磷酸酶的积分是升高的,所以也可以区分出来。
再有细菌感染和病毒感染的时候,也可以做碱性磷酸酶染色。细菌感染的时候,碱性磷酸酶积分是高的,病毒感染的时候是低的,所以也能区分出来。
我开始就说到了,原始细胞不容易区分,不容易识别,我们要做一些组化染色来加以鉴别,那么我们常做的就是过氧化物酶染色(POX)、糖原染色(PAS)以及酯酶染色。
那么我们做过氧化物酶染色(POX),如果要是阳性的话,就可以说明是急性的髓细胞白血病,因为急性淋巴细胞白血病,过氧化物酶是阴性的。具体是急性髓细胞白血病的哪一个亚型?我们下面再接着细分。最起码分出来两大部分,到底是急性淋巴细胞白血病,还是急性非淋巴细胞白血病,一下就区分出来了。
那么如果糖原染色(PAS)是强阳性的,我们就倾向于是一个急性的淋巴细胞白血病。
那么在急性髓细胞白血病里头,粒细胞白血病和单核细胞白血病都可以过氧化酶阳性,那么我们怎么区分?虽然粒细胞白血病可以是阳性强一些,单核细胞白血病可以阳性弱一些,但是我们还可以用另一种手段再来辅助区分,那就是我们的酯酶染色。
我们可以做特异性酯酶染色(SE),也可以做非特异性酯酶染色(NSE)加氟化钠抑制试验。如果是粒细胞白血病和单核细胞白血病的话,特异性酯酶染色都是阳性的,那么在非特异性酯酶染色加氟化钠抑制试验的时候,只有单核细胞白血病,能够50%以上被氟化钠抑制。所以粒细胞白血病和单核细胞白血病也区分出来了。
所以这些过氧化物酶染色(POX)、糖原染色(PAS),还有酯酶染色,都是来帮我们区分原始细胞是哪一个类型的急性白血病的,就是做这个用的。
虽然组化染色,细胞化学染色能够帮我们区分,但是它也不是说非常绝对的,因为还有许多急性白血病它是区分不出来的,所以我们还要借助其他的检测手段,因为随着科技的检测的方法越来越先进,我们现在比如免疫分型、染色体的分析,还有基因的检测,病理的检测,广泛地应用于临床,我们可以用这些先进的手段来做检测,然后共同的来分析,精准的来定位。